期刊简介
本刊为公开发行的医学综合性学术期刊，基本栏目设有基础医学、临床医学、检验医学、影像医学、预防医学、临床护理等。主要刊登实验医学论文和应用医学论文。本学报为中国科技论文统计源期刊，被美国《化学文摘》、《俄罗斯文摘杂志》、中国学术期刊（光盘版）等多家数据库收录。
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首页>蚌埠医学院学报杂志
- 杂志名称：蚌埠医学院学报杂志
- 主管单位：安徽省教育厅
- 主办单位：蚌埠医学院
- 国际刊号：1000-2200
- 国内刊号：34-1067/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：安徽省科技期刊优秀期刊三等奖（05）期刊收录：万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
TRAIL胞膜外段融合蛋白在大肠埃希菌内可溶性表达
周海胜；夏劲松；陈治文；夏俊；刘贤锡
关键词：肿瘤坏死因子, 细胞凋亡, 蛋白质表达, 大肠埃希菌
摘要：目的:研究在大肠埃希菌体内可溶性表达肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)胞膜外段融合蛋白,为其下一步的分离纯化奠定基础.方法:依据原核表达载体pGEX-2T多克隆位点限制性内切酶要求,设计TRAIL胞膜外段PCR引物,对TRAIL的克隆载体进行PCR扩增,回收目的片段后利用DNA连接酶构建TRAIL胞膜外段原核表达载体,应用相关的生物学软件对目的蛋白的理化性质及其溶解性进行预测.酶切鉴定后将阳性重组体转入大肠埃希菌DH5α体内,分别在不同浓度异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)、不同诱导温度、不同诱导时间作用下,利用SDS-PAGE分析目的蛋白可溶性表达量.结果:PCR扩增得到TRAIL胞膜外段DNA片段,酶切结果证实已成功构建了TRAIL胞膜外段原核表达载体,预测表明95%以上的TRAIL胞膜外段融合蛋白是以可溶性的形式表达,在0.1 mmol/L IPTG、20℃诱导3～4 h,目的蛋白可溶性表达量达峰值,占菌体蛋白的28%.结论:本实验可在大肠埃希菌体内表达可溶性的TRAIL胞膜外段融合蛋白.
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