期刊简介

               本刊为公开发行的医学综合性学术期刊,基本栏目设有基础医学、临床医学、检验医学、影像医学、预防医学、临床护理等。主要刊登实验医学论文和应用医学论文。本学报为中国科技论文统计源期刊,被美国《化学文摘》、《俄罗斯文摘杂志》、中国学术期刊(光盘版)等多家数据库收录。                

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  • 杂志名称:蚌埠医学院学报杂志
  • 主管单位:安徽省教育厅
  • 主办单位:蚌埠医学院
  • 国际刊号:1000-2200
  • 国内刊号:34-1067/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:安徽省科技期刊优秀期刊三等奖(05)期刊收录:万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
蚌埠医学院学报杂志2015年第03期

pEGFP-N1-Mxi1-0重组质粒的构建与表达

胡圳圳;李璐;吴小芸;郑大同;吴伟玲

关键词:基因表达, 重组质粒, 细胞定位, Max作用蛋白1-0, 小鼠胚胎成纤维细胞
摘要:目的::构建 Max 作用蛋白1-0(Max interacting protein1-0,Mxi1-0)的真核表达载体,在小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3)中表达,以期为深入研究 Mxi1-0的作用及机制奠定基础。方法:通过 RT-PCR 方法从人肿瘤细胞 HepG2中获得 Mxi1-0基因的编码片段,连接至增强绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-N1)构建成 pEGFP-N1-Mxi1-0。经酶切和测序鉴定重组质粒的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒瞬时转染 NIH/3T3细胞,经荧光显微镜观察和 Western blot 方法检测 Mxi1-0表达,免疫荧光法检测 Mxi1-0在 NIH/3T3细胞内的定位情况。结果:经双酶切和核酸序列测序鉴定证实含 Mxi1-0的重组真核表达载体pEGFP-Mxi1-0构建成功。重组质粒瞬时转染 NIH/3T3细胞后,检测到 Mxi1-0的成功表达,并证实 Mxi1-0主要定位于 NIH/3T3细胞质中。结论:成功构建了真核表达载体 pEGFP-N1-Mxi1-0,并检测到 Mxi1-0的表达,实验证明 Mxi1-0定位于 NIH/3T3细胞质中。